Méthodes de test rapide pour la surveillance des salmonelles dans la production alimentaire

Tirer parti des méthodes de test rapide pour dépister les salmonelles dans les usines de production et de transformation des aliments   

La salmonelle est un type de bactérie qui peut provoquer de graves maladies d'origine alimentaire. C'est pourquoi il est essentiel de détecter sa présence dans les environnements de production alimentaire avant qu'elle ne contamine les produits finis. Alors que Listeria monocytogenes est communément consommée par la plupart des gens en petites quantités sans causer de dommages, une seule bactérie Salmonella peut suffire à provoquer des réactions graves.   

Lorsqu'il s'agit de détecter les salmonelles, la méthode la plus établie est connue sous le nom de ISO 6579:2017. Ce protocole fournit une approche normalisée pour la détection des bactéries dans divers types et matrices d'aliments. Le processus de test ISO lui-même comprend plusieurs étapes :  

• enrichissement de l'échantillon,  
• ensemencement sélectif sur gélose pour détecter la présence de Salmonella.   

Le protocole ISO 6579:2017 est reconnu au niveau international et considéré comme très précis. Cependant, il prend du temps et nécessite plus de ressources par rapport aux méthodes de test rapide.  

Avec les méthodes de test rapide, nous pouvons correspondre à la norme ISO 16140, où les résultats peuvent être obtenus en quelques heures. Les tests rapides utilisent souvent des techniques immunologiques ou biologie moléculaires, comme les dispositifs à flux latéral ou la réaction en chaîne par polymérase (PCR). Les avantages par rapport à la norme ISO 6579, tels que la simplicité, la facilité d'utilisation et la possibilité d'être réalisés n'importe où et à tout moment, rendent les tests rapides très attrayants pour l'industrie. 

Comparaison des différentes méthodes rapides disponibles pour la surveillance de Salmonella en fonction du délai d'obtention du résultat   

Historiquement, les tests rapides sur écouvillon sont sur le marché depuis une vingtaine d'années et utilisent des points finaux colorimétriques ou chromogènes. Ces tests consistent à incuber un écouvillon et à interpréter les résultats en fonction des changements de couleur, de pH ou d'autres indicateurs. Malheureusement, ces tests n'ont pas encore donné des résultats optimaux sur le marché, avec des taux élevés de faux négatifs et de faux positifs. Cela a provoqué l'apparition de nouveaux tests rapides qui prétendent détecter efficacement les salmonelles.   

En ce qui concerne les méthodes plus traditionnelles, comme l'utilisation de Petrifilm ou l'enrichissement avec des milieux différentiels, l'industrie est bien rodée à la détection de Salmonella dans l'environnement, bien qu'avec un temps d'incubation plus long de deux à trois jours. Même si ces tests sont considérés comme rapides, un résultat positif présumé peut prendre jusqu'à 48 à 72 heures. Néanmoins, ces méthodologies sont utilisées depuis 20 ans et l'industrie les connaît bien.   

Bien que le secteur souhaite des méthodes plus rapides, plus simples et moins coûteuses, il reconnaît que ces tests peuvent occasionnellement donner des résultats positifs confirmés. Nous avons rassemblé ci-dessous une liste de méthodes de test rapide de Salmonella basées sur le délai d'obtention du résultat, qui comprend le temps nécessaire au prélèvement de l'échantillon, à son transport au laboratoire, à sa préparation, à son inoculation sur un milieu sélectif, à son incubation et à la confirmation de la croissance de Salmonella. Les résultats sont classés du plus lent au plus rapide. 

 Réaction en chaîne par polymérase (PCR)  

La réaction en chaîne par polymérase (PCR) est une technique de biologie moléculaire permettant d'amplifier des séquences d'ADN spécifiques. Dans le contexte du test rapide de dépistage des salmonelles, la PCR est utilisée pour détecter la présence de salmonelles dans un échantillon alimentaire en amplifiant un gène ou une séquence particulière propre à la bactérie. L'ADN amplifié est ensuite détecté et quantifié, produisant un résultat positif ou négatif. La PCR est une méthode très sensible et spécifique pour la détection de Salmonella. Elle est largement utilisée dans les tests de sécurité alimentaire car elle permet de détecter de faibles niveaux de bactéries dans un échantillon. Cependant, la PCR nécessite également un équipement spécialisé et un personnel qualifié et est généralement réalisée en laboratoire, ce qui augmente encore le coût des tests.   

Délai d'obtention des résultats: Les tests PCR peuvent être effectués sur place ou dans un laboratoire, et les résultats peuvent être obtenus dans les 2 à 6 heures après le enrichment et la préparation de l'échantillon (avec le prélèvement et l'incubation, le temps total pour obtenir des résultats est de 3 à 4 jours). 

Test immunologique lié à l'enzyme (ELISA) 

Le test ELISA est un test de diagnostic rapide qui utilise des anticorps et des enzymes pour détecter la présence d’organisme cibles spécifiques, telles que les salmonelles. La méthode fonctionne selon le principe des immunoessais et est souvent utilisée pour les tests sur le lieu de traitement. Le test fonctionne en recouvrant une plaque d'anticorps spécifiques aux Salmonella, puis en ajoutant l'échantillon alimentaire. Si des salmonelles sont présentes dans l'échantillon, elles se lient aux anticorps de la plaque, formant un complexe antigène-anticorps. La présence de ce complexe est ensuite détectée par l'ajout d'un anticorps secondaire conjugué à une enzyme, qui génère un signal visible. ELISA est une méthode simple, rapide et peu coûteuse pour la détection de Salmonella, ce qui en fait un outil populaire pour les tests de sécurité alimentaire. 

Délai d'obtention des résultats : Une fois que les échantillons ont été prélevés et transportés au laboratoire, la méthode ELISA peut être utilisée après la préparation et l'incubation des échantillons. Les résultats peuvent être obtenus dans les 3 à 6 heures suivant le début du test. (Avec le prélèvement des échantillons et l'incubation, il faut compter au total 3 à 4 jours pour obtenir les résultats). 

Amplification isotherme médiée par une boucle (LAMP)  

LAMP est un test très sensible et spécifique qui permet de détecter les Salmonella en peu de temps. Il s'agit d'une technique de biologie moléculaire utilisée pour amplifier l'ADN et réalisée dans des conditions de température constante, sans nécessiter de cycles de température. La méthode LAMP présente l'avantage d'être simple, rapide et adaptée à une utilisation sur le terrain. En outre, elle peut être réalisée sur place, ce qui élimine la nécessité d'une analyse en laboratoire et réduit le temps nécessaire à l'obtention des résultats. Cependant, la méthode LAMP nécessite un équipement spécialisé et une formation pour être utilisée avec précision.   

Délai d'obtention des résultats: Les tests LAMP peuvent être effectués sur place ou en laboratoire, et les résultats peuvent être obtenus en 2 à 4 heures environ après le prélèvement et la préparation des échantillons. 

Immuno-essai à flux latéral (LFIA)  

L' immuno-essai par flux latéral (LFIA) est un test de diagnostic rapide qui utilise des anticorps et des indicateurs visuels pour détecter la présence d'une organisme cible spécifique, telle que la Salmonelle. Il fonctionne sur le principe de l'immunochromatographie et est couramment utilisé pour les tests au point de service. Le test est basé sur un procédé de chromatographie en couche mince. Le test fonctionne en faisant couler un échantillon, tel qu'un échantillon alimentaire, sur une bande recouverte d'anticorps. Si des salmonelles sont présentes, elles se lient aux anticorps de la bandelette et génèrent un signal visible, indiquant un résultat positif. Ce test est simple, rapide et ne nécessite pas d'équipement spécialisé, ce qui le rend idéal pour les installations de production alimentaire. Cependant, il est moins sensible que la PCR et peut produire des faux négatifs.   

Délai d'obtention des résultats: Le LFIA peut être réalisé sur place ou en laboratoire, et les résultats peuvent être obtenus dans les 20 à 30 minutes suivant le prélèvement et la préparation de l'échantillon. 

Test rapide N-Light^TM Salmonella Risk  

NEMIS Technologies AG a développé la méthode de détection N-Light^TM Salmonella Risk pour détecter une contamination potentielle par Salmonella dans l'environnement d'un producteur alimentaire. La méthode N-Light^TM est adaptée à une utilisation dans les zones et équipements de transformation des aliments dans le cadre d'un programme de surveillance environnementale. Utilisation d'outils manuels : Luminomètre, bloc chauffant, test N-Light^TM Salmonella Risk et écouvillon sec stérile avec PBS séparé, il suffit de 5 étapes simples pour réaliser tout dépistage de pathogènes directement en usine. NEMIS a développé un bouillon d'enrichissement exclusif contenant un mélange de bactériophages pour éliminer la microflore concurrente et cultiver sélectivement les agents pathogènes ciblés. Comparé à LAMP et LFIA, N-Light^TM Salmonella Risk est plus sensible que n'importe quelle méthode chromogène.  

Délai d'obtention des résultats: N-Light^TM Salmonella Risk est l'une des méthodes les plus rapides disponibles sur le marché car les résultats peuvent être obtenus en 24 heures (pour être plus exact: 24 heures + 3 minutes + 10s.). 

Conclusion  

En conclusion, le rapport coût-efficacité des méthodes de test rapide dépendra des besoins spécifiques de l'installation de production alimentaire. Si les méthodes de test rapide peuvent potentiellement être plus rentables que les méthodes traditionnelles, cela dépend de facteurs tels que le niveau de précision requis, le coût du test et la facilité d'utilisation. Par conséquent, les installations de production alimentaire doivent soigneusement prendre en compte ces facteurs lors du choix d'une méthode de test afin de s'assurer qu'elles obtiennent le meilleur rapport qualité-prix.